簡(jiǎn)要描述:miRNA定量檢測 MicroRNA(miRNA)是一類(lèi)長(cháng)度約19-24nt的非編碼單鏈RNA,通過(guò)堿基互補配對的方式與靶基因的3'-UTR區部分或*互補,剪切靶基因的轉錄產(chǎn)物或者抑制轉錄產(chǎn)物的翻譯,從而起到轉錄后調控靶基因表達的作用。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因組中,調控生物體生長(cháng)發(fā)育和疾病發(fā)生等過(guò)程中相關(guān)基因的表達。
miRNA定量檢測服務(wù):
MicroRNA是一類(lèi)長(cháng)度約19-24nt的非編碼單鏈RNA,通過(guò)堿基互補配對的方式與靶基因的3'-UTR區部分或*互補,剪切靶基因的轉錄產(chǎn)物或者抑制轉錄產(chǎn)物的翻譯,從而起到轉錄后調控靶基因表達的作用。它廣泛存在于動(dòng)物、植物、真菌及病毒的基因組中,調控生物體生長(cháng)發(fā)育和疾病發(fā)生等過(guò)程中相關(guān)基因的表達。MiRNA的異常表達可能會(huì )導致生理狀態(tài)的異常和疾病的產(chǎn)生,在多種癌癥中,miRNA的表達水平會(huì )發(fā)生明顯改變,有可能起到原癌基因和抑癌基因的作用。此外,在許多其他的病變組織和細胞中也檢測到了miRNA的異常表達。因此對miRNA的表達的研究具有重要意義。
MiRNA的實(shí)時(shí)定量PCR(Real-time quantitative PCR)檢測
運用成熟的實(shí)時(shí)定量PCR技術(shù)準確、快速地定量檢測各種組織、原代細胞及細胞系中目的microRNA的表達情況,具有靈敏度高、實(shí)驗周期短和特異性高等特點(diǎn),實(shí)驗結果見(jiàn)圖1和圖2。
目的miRNA和內參(U6 snRNA)的擴增曲線(xiàn)
目的miRNA和內參(U6 snRNA)的熔解曲線(xiàn)
miRNA定量檢測送樣要求:
細胞(≥106)、組織(≥300mg)、血液(≥1ml)、血清(≥1.5ml)等樣品材料,總RNA(≥20μl,濃度≥ 50ng/μl)。